Taq Pol - Master mix (2X) (200 reações)
Código: POL101M - Referência: Taq Pol - Master mix (2X)
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DESCRIÇÃO
Taq Pol Master mix 2X contém Taq DNA Polimerase em tampão otimizado contendo Mg2+ e dNTPs. Contém todos os reagentes requeridos para realização da PCR (com exceção dos oligonucleotídeos e DNA molde) em forma de mix 2X concentrado e pronto para uso. Deve ser empregado na concentração de 1X em reações de de 25 a 50 µL. O Master mix é recomendado para reações de PCR rotina a partir de soluções puras de DNA, colônias bacterianas e cDNA. É otimizado para alta especificidade, garantido o mínimo de formação de subprodutos.
CONTEÚDO
Taq Pol Master Mix 2X (tampa verde)
Master mix contendo DNA polimerase termoestável, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl2 e estabilizantes.
PROTOCOLO
Apenas para uso in vitro!
Ensaio recomendado: 50 µL
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Componente |
[ final ] |
Volume |
|
Taq Pol Master Mix 2X |
25 µL |
1 X |
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10 µM Oligonucleotídeo senso |
1 µL |
0.2 µM |
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10 µM Oligonucleotídeo antisenso |
1 µL |
0.2 µM |
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DNA molde |
variável |
10 pg - 1 µg** |
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Água grau PCR |
q.s.p 50 µL |
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**DNA genômico: 1 ng-1μg; DNA plasmidial ou viral: 1 pg-1 ng
Condições de ciclagem recomendadas
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Denaturação inicial |
95 °C |
1 min |
1 X |
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Denaturação |
95 °C |
15-30 s |
30 X |
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Hibridização1 |
45-68 °C |
15-30 s |
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Elongação2 |
72 °C |
30 s - 4 min |
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Elongação final |
72 °C |
2 min |
1 X |
1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.
2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.
TRANSPORTE E ARMAZENAGEM
Transportado em blue ice
Armazenada à -20 °C. Evite ciclos de congelamento/descongelamento.
Taq Pol Master Mix 2X é estável por até 3 meses a 4ºC