Taq Pol - Master mix (2X) - Green - M Pack (200 Reações)

Código: POL102M - Referência: Taq Pol - Master mix (2X)

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DESCRIÇÃO

Taq Pol Master Mix 2X Green contém Taq DNA Polimerase em tampão otimizado contendo Mg2+ e dNTPs. O master mix é suplementado com corantes de rastreamento para carregamento direto dos produtos de PCR em geis de eletroforese. Contém todos os reagentes requeridos para realização da PCR (com exceção dos oligonucleotídeos e DNA molde) em forma de mix 2X concentrado e pronto para uso. Deve ser empregado na concentração de 1X em reações de de 25 a 50 µL. O Master mix é recomendado para reações de PCR rotina a partir de soluções puras de DNA, colônias bacterianas e cDNA. É otimizado para alta especificidade, garantido o mínimo de formação de subprodutos. Os corantes de rastreamento empregados não interferem na performance da reação de PCR e são compatíveis com aplicações posteriores, tais como, sequenciamento ligação ou reações de digestão.

 

 

CONTEÚDO

Taq Pol Master Mix 2X Green (tampa verde)

Master mix contendo DNA polimerase termoestável, dATP, dCTP, dGTP, dTTP, KCl, MgCl2, corante, tampão de carregamento e estabilizantes.

 

 

PROTOCOLO

Apenas para uso in vitro!

 

Ensaio recomendado: 50 µL

Componente [ final ] Volume
Taq Pol Master Mix 2X Green 25 µL 1 X
10 µM Oligonucleotídeo senso 1 µL 0.2 µM
10 µM Oligonucleotídeo antisenso 1 µL 0.2 µM
DNA molde variável 10 pg - 1 µg**
Água grau PCR q.s.p 50 µL  
     

**DNA genômico: 1 ng-1μg; DNA plasmidial ou viral: 1 pg-1 ng

 

Condições de ciclagem recomendadas

Denaturação inicial 95 °C 1 min 1 X
Denaturação 95 °C 15-30 s 30 X
Hibridização1 45-68 °C 15-30 s
Elongação2 72 °C 30 s - 4 min
Elongação final 72 °C 2 min 1 X
       

1 A temperatura de hibridização depende da temperatura denaturação (melting) do oligonucleotídeo empregado.

2 O tempo de elongação depende do tamanho do fragmento que se pretende amplificar. Recomenda-se 1 min por kb.

 

 

TRANSPORTE E ARMAZENAGEM

Transportado em blue ice

Armazenada à -20 °C. Evite ciclos de congelamento/descongelamento.

Taq Pol Master Mix 2X é estável por até 3 meses a 4ºC


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